Técnica de edición de ácidos nucleicos en la fibrosis quística
Edición de p.F508del en células de pacientes con fibrosis quística
- Tipo de edición: Ex vivo, somática
- Dirigido hacia: ADN genómico - Mutación ΔF508 del gen CFTR
- Dirigido por:
CRISPR/Cas9, nucleasas SpCas 9; sgRNA y ssODN (oligodesoxinucleótido monocatenario)
Uso de vector: plásmido pGEM-CFTR
- Órgano/célula a tratar: Células CFTE29o- (Línea celular epitelial traqueal de fibrosis quística humana) y células madre pluripotentes inducidas (iPSC) derivadas de pacientes con fibrosis quística (FQ)
- Vía de administración: Vía parenteral
- Resultados
Corto plazo: SpCas9 (HF4) -sp_sg # 1 junto con sp_ssODN # 1 fueron las combinaciones más precisas y efectivas en el locus genómico: la mutación p.F508del se corrigió con precisión en casi el 50% de las roturas de doble hebra de ADN inducidas por Cas9.
Tras evaluar las inserciones de CTT en el gen CFTR (corrección de la mutación p.F508del). A diferencia de los experimentos con células CFTE29o-, en las iPSC casi todas las combinaciones CRISPR / Cas9 utilizadas fueron precisas. Sin embargo, la combinación SpCas9 -sp_sg # 2 con sp_ssODN # 2 condujo a una HDR imperfecta en todos los casos en el locus del plásmido.
Mediano plazo: Los resultados demuestran que aunque CRISPR/Cas9 se puede utilizar para corregir células individuales en el cultivo, todavía queda un largo camino por recorrer para lograr resultados clínicamente significativos.
Largo plazo: Se espera que esta CRISPR/Cas9 corrija permanentemente la expresión fisiológica de la mutación ΔF508, para poder aplicarla en otras mutaciones del gen CFTR.
Información Obtenida de:
LA vía de administración es parenteral, 0.9/1. Entrada de SC 1/1
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